В России более 20% населения страдают бесплодием. Экстракорпоральное оплодотворение (ЭКО) - это вспомогательные технологии, которые помогают семейным парам обрести счастье материнства и отцовства.

Первый ребенок из пробирки появился на свет 35 лет назад. На сегодняшний день таких детей на Земле около 4,5 миллионов.

Часто люди, решившиеся зачать малыша с помощью репродуктивных технологий, сталкиваются с таким понятием, как качество эмбрионов и их классы.

Это совокупность параметров, которые помогают эмбриологу выбрать самые генетически полноценные и жизнеспособные эмбрионы, что позволяет обеспечить появление на свет долгожданного ребенка и избежать многоплодия.

При подготовке к процедуре ЭКО проводится гормональная стимуляция яичников, которое вызывает одновременное созревание нескольких яйцеклеток.

Суть методики экстракорпорального оплодотворения заключается в заборе женских зрелых яйцеклеток, оплодотворении их семенной жидкостью мужа, выращивании получившихся зародышей в лабораторных условиях до определенной стадии развития и подсаживании в полость матки будущей матери.

Одновременно оплодотворяются несколько яйцеклеток и получается несколько эмбрионов.

Все дело в том, что когда он подсаживается женщине, существует большая вероятность его отторжения, поэтому одновременно выращивают несколько.

Самым важным в цепочке репродуктивной технологии является эмбриологический этап, от того, каким будет качество эмбрионов при ЭКО зависит вероятность наступления полноценной беременности.

Культивация Эмбрионов

Выращивание эмбрионов происходит в специальных инкубаторах, где автоматически поддерживается определенная влажность, газовый состав, температура.

Культивация эмбрионов происходит в особой среде, которая по своим основным параметрам является аналогом внутренней среды полости матки.

Женщине проводят гормональную терапию, целью которой является стимулирование функции яичников. Процедура экстракорпорального оплодотворения начинается с трансвагинальной пункции, во время которой репродуктолог берет забор фолликулярной жидкости, содержащей женские яйцеклетки.

Выделенные яйцеклетки культивируются до момента оплодотворения в лабораторных условиях. Параллельно с выделением яйцеклеток происходит забор генетического материала мужа. Сперма обрабатывается с целью выделения самых жизнеспособных и активных сперматозоидов.

Затем оплодотворяют женскую яйцеклетку полученным концентратом семенной жидкости.

Развитие эмбриона при ЭКО продолжается около пяти суток с момента пункции и состоит из следующих этапов:

1. Результатом слияния яйцеклетки и сперматозоида является образование зиготы. Этот клеточный цикл длится 24 часа. Затем происходит интенсивное деление клеток зиготы, в результате деления образуются две равноценные клетки, которые называются бластомерами. Из бластомеров при последующем делении образуются все клетки человеческого тела;
2. На второй день деление эмбриона достигает стадии восьми бластомеров. На этой стадии бластомеры приобретают специализацию. Это самый уязвимый этап для зародышей, на котором может возникнуть блок развития и эмбрион полностью прекращает деление;
3. На третий день количество бластомеров достигает 12-14. Межклеточные связи уплотняются, эмбрион выглядит как шарик с идеально гладкими контурами. Эта стадия развития эмбриона носит название морула. Именно на этой стадии при естественном развитии событий эмбрион спускается в матку. Во многих клиниках на этом этапе развития эмбрион считают полностью созревшим для имплантации;
4. При достижении стадии шестнадцати бластомеров, которая наступает на четвертые сутки. И носит название бластоциста. Начинается процесс кетчинга, который можно сравнить с выклевом птенчика из яйца. Эмбрион выходит из блестящей оболочки и становится способным к успешному переносу в полость матки. Культивирование эмбриона до стадии бластоцисты позволяет сделать процедуру ЭКО более физиологичной.

Ежедневно репродуктолог фиксирует качество эмбрионов, все параметры зародышей описываются в специальном журнале - протоколе. Подсадка эмбрионов происходит на 3-5 сутки после пункции.

Из всех развившихся эмбрионов выбирают те, приживление которых наиболее вероятно. Критерием отбора служат морфологические признаки. К ним относятся:

• Степень фрагментации. Этот параметр определяет соотношение нормальных бластомеров к клеткам, не имеющим ядра;
• Количество клеток эмбриона должно точно соответствовать дню развития;
• Клетки должны быть одинакового размера и иметь правильную форму.
• Деление должно происходить в определенное время и быть равномерным;
• В эмбрионе хорошего и отличного качества должны отсутствовать включения. Присутствие включений цитоплазмы - плохой признак.

На основании этих признаков разделяют классы эмбрионов ЭКО.

Классы эмбрионов ЭКО

В большинстве клиник имплантируют 3-5 дневные эмбрионы. В связи с этим разработана классификация именно для этих стадий развития.

Залогом успешности процедуры ЭКО является выбор наиболее генетически здоровых и жизнеспособных эмбрионов.

Репродуктолог ежедневно следит за их развитием с момента оплодотворения и контролирует их качество.

Классификация трехдневных эмбрионов

Для имплантации используют эмбрионы отличного и хорошего качества. Для обозначения класса и качества используют специальную маркировку. Маркировка состоит из комбинации букв и цифр, где буква обозначает процент фрагментации, а цифра - количество клеток эмбриона.

1. Отличного качества А. Эмбрионы этого класса отличаются высокой скоростью деления, правильной сферической формой бластомеров, максимальной способностью к имплантации;
2. Хорошего качества B. Характеризуются неровной формой бластомеров, умеренной фрагментацией, высокой способностью к имплантации;
3. Удовлетворительного качества С. Фрагментация таких эмбрионов составляет от 10 до 50%;
4. Плохого качества D. Эмбрионы этого класса имеют процент фрагментации более 50 % и отбраковываются.

Например, запись 4А расшифровывается как четырехклеточный эмбрион отличного качества без фрагментации.

В полость матки единовременно подсаживают от одного до трех эмбрионов, рассчитывая, что хоть один из них приживется.

Оставшиеся хорошего и отличного качества замораживают, чтобы использовать в следующих циклах ЭКО. Так можно избежать излишней гормональной терапии.

Классификация пятидневных эмбрионов

Качество пятидневных эмбрионов оценивается по размеру бластоцисты, качеству внутриклеточной массы, качеству трофоэктодермы.

Класс эмбрионов на стадии бластоцисты маркируется комбинацией цифр и двойным буквенным обозначением:

• Качество эмбрионов на стадии бластоцисты оценивается по степени экспансии (размеру бластоцисты) и обозначается цифрами от 1 до 6. Где 1 - это ранняя бластоциста, 2 - средняя, 3 - экспандированная, 4 - бластоциста с начавшимся кетчингом, 5 - бластоциста в хетчинге, 6 - бластоциста с завершившимся хетчингом;
• Плотность и отсутствие видимых дефектов обозначается буквами A, B, C, D. Где А - это наиболее качественный, плотный эмбрион. А эмбрионы, маркированные буквой D, являются дефектными и отбраковываются;
• Расположение клеток, наличие или отсутствие включений также маркируется буквами A, B, C и D. Где А - эмбрион с плотными межклеточными связями и отсутствием цитоплазматических включений, а D - дегенеративный зародыш.

Например, эмбрион 5АВ - хороший эмбрион в стадии хетчинга с незначительными дефектами.

Какие факторы влияют на качество эмбриона при ЭКО

Прежде всего, качество эмбрионов зависит от показателей генетического материала родителей.

В свою очередь качество яйцеклеток и семенной жидкости зависит от многих факторов. Негативно влияют на активность половых клеток следующие условия:

1. Проживание в крупных городах с неблагоприятной экологической обстановкой;
2. Вредные привычки: курение и употребление алкогольных напитков;
3. Лишний вес обоих супругов;
4. Соблюдение вегетарианской диеты;
5. Постоянный стресс;
6. Гормональная терапия.

Видео: Развитие Эмбриона от оплодотворения до подсадки

Заключение

Минимизировать неблагоприятное влияние этих факторов на качество эмбрионов поможет тщательная подготовка к репродуктивной процедуре. За два месяца до планируемого забора материала мужчина и женщина должны придерживаться здорового образа жизни. Правильно питаться, отказаться от курения и алкоголя, избегать посещения сауны, принимать витаминные добавки.

К немаловажным факторам, влияющим на то, приживется ли эмбрион при ЭКО относится профессионализм врача эмбриолога и оснащенность клиники современным медицинским оборудованием и препаратами.

Культивирование

Начало культивирования зародышей происходит на следующий день после забора фолликулов. Врачом-эмбриологом производится оценка качества эмбрионов при ЭКО. Затем соединяются женские и мужские половые клетки, через некоторое время врач рассматривает под микроскопом скорость деления биоматериала.

Дата переноса бластоцист назначается в зависимости от количества биоматериала. Классификация эмбрионов по качеству при ЭКО определяется сутками.

Культивирование эмбрионов – это один из этапов ЭКО, поддерживающий жизнедеятельность зародыша перед их подсадкой в матку.

Зигота помещается в жидкость, схожую по температурному режиму и составу в маточных трубах. Создается подобная жидкость в лабораторных условиях. Чтобы клетки не погибли раньше времени, они постоянно находятся под присмотром медицинского персонала.

Какого качества бывают эмбрионы:

1. 2 сутки – при этом контуры бластомеров четкие, форма – правильная, высокая способность имплантации;
2. 3 сутки – бластомеры и цитоплазмы неровные, нормальная способность имплантации;
3. 4 сутки – удовлетворительная способность имплантации;
4. более 4 суток – неудовлетворительная способность имплантации.

Чтобы выбрать самые жизнеспособные зародыши, стараются использовать как можно больше яйцеклеток.

Качество

5 клеточный эмбрион считается нормой и достаточно часто применяется в медицинской практике. Для того, чтобы процедура ЭКО прошла успешно, обязательно проводится культивирование гамет. Качество эмбрионов для переноса при ЭКО зависит от многих факторов.

От чего зависит качество эмбрионов при ЭКО:

1. экология;
2. вредные привычки;
3. наличия заболевания половых органов;
4. иммунная система;
5. лишний вес;
6. несбалансированное питание;
7. стрессовые ситуации;
8. гормональные сбои.

Классы эмбрионов в ЭКО говорят о качестве биоматериала, от которого зависит исход процедуры.

Качество эмбрионов и их классы тесно связаны друг с другом. Существует 4 класса:

• класс А – полностью отсутствую безъядерные фрагменты;
• класс В–не более 20% безъядерных фрагментов от общего объема;
• класс С – содержание ануклеарных фрагментов от 21% до 50%;
• класс D – содержится более 50% безъядерных фрагментов, категория не используется для дальнейшего проведения процедуры.

Фрагментация эмбриона при ЭКО чаще всего говорит о каких-либо генетических нарушениях со стороны женских или мужских репродуктивных органах.

Классы

На сегодняшний день оценка качества зародышей происходит по количеству клеток, а также степени фрагментации.Если в карте ставится: эмбрионы 8а - это значит, что зигота содержит 8 клеток, а фрагментация полностью отсутствует. Также учитывается равномерность дробления, наличие вакуолей и отсутствие ядерных бластомеров.

Эмбрион bl1 – это маленькая бластоциста, качество которой на данном этапе оценить очень трудно. Имплантация дает положительные результаты в том случае, если хорошо развита внутренняя клеточная масса бластоцисты и трофобласт.

Эмбрион 4аа класса – это хорошее качество бластоцисты, имплантируется с вероятностью более 70%. Первая проверка качества зародыша происходит через 48 часов после изъятия яйцеклетки для проведения ЭКО. Оплодотворение яйцеклеток и качество зиготы оцениваются в первый день после подсадки.

Зародыши выбирают по следующим критериям:

1. степень фрагментации;
2. качество;
3. однородность и форма клетки;
4. время деление клетки;
5. отсутствие цитоплазмы.

Для проведения ЭКО оставляют только самые сильные зародыши для проведения.

Протокол культивирования

Протокол культивирования эмбрионов по дням проводится для того, чтобы выбрать более сильные зародыши.

Развитие зародышей происходит следующим образом:

• 1 день – проводится пункция;
• 2 день – клетки начинают делиться, при нормальном развитии должно быть от 2 до 4 бластомер;
• 3 день – здоровые клетки продолжают делиться, бластомеров уже от 6 до 8;
• 4 день – клетки разделяются на 10-16 бластомеров;
• 5-6 день – бластомеры превращаются в бластоцисты, что увеличивает шансы имплантации.

Самые лучшие среды для культивирования эмбрионов считается та, которая близка к среде жидкости, находящейся в маточных трубах. В каждом отдельном случае проводится индивидуальное культивирование эмбриона в естественном цикле, так как у каждой женщины сроки овуляционного цикла свои.

Расшифровка протокола производится исключительно врачом-эмбриологом на основании формы, цвета, размера бластоцисты. Лаборант ежедневно проводит исследование каждого зародыша и вносит отметку в карту. Такой подход помогает выбрать самый подходящий образец для подсадки в маточные трубы будущей матери.

Противопоказания

ЭКО не имеет противопоказаний, однако, при внутриматочном введении эмбриона существуют некоторые факторы, при которых данную процедуру проводить не рекомендуется.

К противопоказаниям относятся:

• опухоли различной этиологии;
• фиброма;
• нарушения функций репродуктивных органов;
• отсутствие матки;
• инфекционные заболевания;
• воспалительные процессы;
• обострения хронических заболеваний.

Если ЭКО несколько раз подряд не дает положительных результатов, это значит, что есть проблемы с яйцеклетками или сперматозоидами. В таком случае врачи советуют выбрать другой получения биоматериала, например, ИКСИ. Процедура подразумевает введение сперматозоида в цитоплазму ооцита.

Какой бы метод оплодотворения не использовался, часть материала останется непригодной. Одни зародыши быстро погибают, прекращая свой рост, другие имеют неподходящий генотип. По статистике в лучшем случае пригодны лишь 68% образцов. Культивирование помогает увеличить шанс прикрепления зародыша к матке. При хорошей подготовке приживается до 95% бластоцист.

Эмбриология

Оценка качества ооцитов и эмбрионов

Все пациенты интересуются качеством полученных клеток, а в дальнейшем и качеством эмбрионов. Однако данный вопрос многофакторный и не имеет однозначного ответа. Начнем с начала. Первый вопрос, который задают пациенты, когда к ним в палату после процедуры забора ооцитов приходит эмбриолог, звучит всегда одинаково: «А клетки у меня хорошие?». Хочется сразу заметить, что на этот вопрос очень сложно ответить на данном этапе программы ВРТ. Первичная оценка ооцита основана на непосредственном визуальном анализе морфологии ооцит-кумулюсного комплекса. При получении ооцитов эмбриолог смотрит на клетки через бинокулярный микроском с незначительным уровнем увеличения. Выглядит это вот так:

В данной ситуации оценить детально качество ооцитов не представляется возможным. Эмбриолог может только делать предположения. Поэтому оценка ооцитов на этапе проведения трансвагинальной пункции яичников не проводится.

После забора ооцитов эмбриолог определяется с тем, каким методом проводить оплодотворение полученных клеток.

Метод оплодотворения выбирается на основании показателей мужского материала. Если показатели спермограммы снижены – выбирается метод ICSI. Суть его заключается в том, что эмбриолог очищает ооциты от клеток кумулюса и с помощью специальных инструментов, работая на специальном микроскопе, вводит морофологически хороший, активно-подвижный сперматозоид внутрь клетки. Перед тем как ввести сперматозоид в клетку, его обездвиживают. Данный метод оплодотворения предлагается также парам с бесплодием неясного генеза и пациентам, планирующим проведение преимлантационной генетической диагностики. Помимого этого, ИКСИ может быть проведено по желанию пациента.

При хороших показателях спермограммы проводится оплодотворение методом ЭКО. В чашке со специальной средой соединяют сперматозоиды и ооциты, а оплодотворение происходит естественным способом.

Итак, поговорим более подробно о зрелости и качестве ооцита.

Созревание ооцита до состояния, когда он способен к оплодотворению, происходит в процессе стимуляции суперовуляции, проводимой врачом гинекологом-репродуктологом. Не все ооциты в процессе стимуляции достигают зрелости.

• Способны оплодотворятся только ооциты, находящиеся в стадии метафазы 2 процесса мейоза. Их обозначают как М2.

Зрелый ооцит выглядит так

• Ооциты не достигшие зрелости имеют отличия от ооцита М2, которые эмбриолог способен увидеть только при выполнении оплодотворения методом ICSI. Незрелые ооциты имеют 2 вида: это клетка находящаяся в метафазе 1 мейоза (М1) и так называемый герминальный везикул (GV) ооциты в профазе I деления мейоза, определяемые по наличию зародышевого пузырька или ядерной оболочки в цитоплазме.

М1

При оплодотворении методом ЭКО такую оценку не проводят. Возможность оценить клетки в данной ситуации возникает только утром следующего дня, а в это время не всегда возможно понять, какими клетки были в момент пункции, т.к. они имеют возможность пройти процесс дозревания в условиях инкубатора.

Что такое качество ооцита

Качество ооцита характеризует внешний вид цитоплазмы, вителлинового слоя, полярного тельца. Гомогенная цитоплазма с однородным цветом и отсутствием гранулярности характеризует хорошее качество ооцита. Вакуоли, темная окраска, всевозможные включения, деформация или гранулярность расцениваются при морфологической оценке качества ооцита как негативные признаки.

Ооцит плохого качества , с гранулированной цитоплазмой и вакуолью большого размера в центре.

Оценка оплодотворения

Оценка оплодотворения проводится утром следующего за пункцией дня. Этот день считается 1-м днем эмбрионального развития.

Возможность понять, произошло ли оплодотворение клетки, появляется через 18 часов после оплодотвоерния и характеризуется формированием пронуклеусов. Эмбрион первых суток развития называется зиготой.

На этот день эмбриолог оценивает «правильность» оплодотворения. Нормально оплодотворившийся ооцит содержит 2 пронуклеуса. Все остальные варианты считаются отклонением.

Триплоидный эмбрион (3pn)

Аномально оплодотворившиеся эмбрионы исключаются из культивирования.

Оценка качества эмбрионов 2-3 дня развития

Начиная со вторых суток эмбрионального развития начинается фаза дробления.

Дробление - это синхронное быстрое деление эмбриона на равные крупные клетки. Эти клетки называются бластомерами. Оценка качества эмбриона производится по равномерности бластомеров. Чем более равномерные бластомеры содержит эмбрион, тем лучшим считается его качество. Оценку эмбрионов данных суток развития осуществляют по количеству бластомеров (обозначается цифрой) и по дополнительным критериям, таким как равномерность бластомеров и наличие фрагментации (оценивается латинскими буквами a,b,c,d и их комбинацией).

Эмбрион хорошего качества выглядит так.

4-е сутки эмбрионального развития

На 4-е сутки развития эмбрион человека состоит уже, как правило, из 16-18 клеток, межклеточные контакты постепенно уплотняются, и поверхность эмбриона сглаживается. Этот процесс называется компактизацией. Важно понимать, что до 3-х суток дробление эмбриона происходит механически, каждая клетка делится пополам, черпая энергию из запасов ооцита. Начиная с 4 суток эмбрионального развития начинается дифференциация клеток эмбриона, часть из них сформируют зародыш, остальные будут обеспечивать возможность имплантации и формирования плаценты.

На данном этапе эмбрионы наиболее чувствительны к отрицательным воздействиям.

Качество бластоцисты, которая сформируется из морулы, оценить практически невозможно.

Оценка качества морулы проводится по характеристикам компактизации:

А - эмбрион полностью компактизован. Клеточные мембраны видны нечетко.

В - компактизовано более 75% бластомеров. Эмбрион сохраняет сферичную форму и гладкую поверхность.

С - частичная компактизация (около 50% бластомеров).

D - компактизация менее 50% бластомеров. Различимы фрагменты и некомпактизовавшиеся бластомеры.

Морулы отличного качества

Морула плохого качества

Далее внутри морулы начинает формироваться полость. Когда эта полость достигает достигает 20% от ее объема, эмбрион называется бластоцистой. В норме формирование бластоцисты допускается с конца 4-х по середину 6-х суток развития, но чаще это происходит на 5-е сутки. В редких случаях возможно формирование бластоцисты к 7-м суткам эмбрионального развития.

Бластоциста состоит из двух популяций клеток, таких как: трофэктодерма (однослойный эпителий, окружающий полость) и внутренняя клеточная масса (плотное образование из клеток внутри бластоцисты). Из трофэктодермы сформируется в дальнейшем плацента и все зародошевые оболочки. Из внутренней клеточной массы будут формироваться все ткани и органы будущего ребенка. На данном этапе развития эмбрион оценивают по 3 критериям:по размеру полости, качеству трофэктодермы и качеству внутриклеточной массы.

Размер полости оценивают цифрой от 1-ого до 4-х. Внутриклеточную массу и трофэктодерму оценивают буквами от А до С. Первая буква в оценке качества будет относится к внутриклеточной массе, вторая – к качеству трофэктодермы. Если бластоциста успела совершить «хетчинг» (разрыв оболочки, окружающий эмбрион), такой бастоцисте присваивается цифра 5. Если же бластоциста успела полностью выбраться из оболочки после хетчинга, такую бластоцисту обозначат цифрой 6. Размер полости имеет меньшее значение в определении качества эмбриона, чем буквенная классификация. Ввиду того, что эмбрионы имеют индивидуальные особенности, они могут развиваться неравномерно. Любой размер полости определяется как вариант нормы. Буквенные обозначения следует понимать так: наивысшее качество оценивается буквой А, наихудший вариант развития внутриклеточной массы и трофэктодермы обозначается буквой С.

Важно понимать, что критерии оценки эмбрионов носят субъективный характер. Даже эмбрионы, оцененные по классификации как эбмрионы среднего и ниже среднего качества, могут дать полноценную беременность.

Бластоцисты хорошего качества

3АА

4АА

5АА

5АА

6АА

Бластоцисты среднего качества

1АВ

2ВВ

Бластоцисты плохого качества

3ВС

2СС

Вопросы специалистам

Эко Елена, 18.09.2019

Добрый день! Подскажите пожалуйста, была лапароскопия с удалением трубы. Сколько времени необходимо на восстановление, чтобы начать протокол ЭКО? И ещё вопрос - может ли муж заранее сдать сперму, и в протоколе использовать замороженную для переноса? Так как возможности приехать на перенос не будет никак

Читать ответ

Пустые фолликулы Ирина, 18.09.2019

Добрый день. 1протокол-амг 1,67; 32года; стимуляция гонал 187,5 триггер диферелин 0,2:получено 7ооцитов, на 5 сутки 1 эмбрион. 2протокол-амг 1,26;34года; стимуляция перговерис 150+гонал 75; триггер овитрель 250: ни одного ооцита. Не подошла стимуляция или? Причина? Чем дальше стимулировать?

Читать ответ

Медицинские услуги ненадлежащего качества Надежда, 16.09.2019

Здравствуйте, в другой клинике делали криоперенос, врач не ознакомилась ни с одним свежим анализом сделанным специально для этого переноса, только с 2 мя гормонами, можно ли это расценивать как халатное отношение, имел ли право доктор назначать в поддержку лекарства, не зная даже результатов анализа крови, мочи и т.д. Планирую подать заявление на возврат денежных средств за оказанную услугу ненадлежащего качества

Читать ответ

Миома матки в сочетании с аденомиозом Ирина, 12.09.2019

Уважаемый Максим Станиславович! Хочу обратиться к Вам со своей проблемой. Сейчас мне 30 лет, есть один малыш 3 годика. На протяжении лет 10 наблюдаюсь у гинеколога в связи с наличием множественной миомы в сочетании с аденомиозом. На месте узлы не стоят, имеется динамика роста. Долгое время наблюдаюсь у одного гинеколога, но хожу дополнительно за консультациями ещё к другим. Все врачи, делая узи охают и ахают, что у меня с маткой в таком достаточно молодом возрасте. Никто никакого лечения не назначал. Забеременеть не могли чуть больше года, хотели уже стимулировать яичники и отправлять на ЭКО, но получилось забеременеть самостоятельным путём и выносить без проблем. После походу к доктору, который меня и мой орган наблюдает уже долгое время, сказала, что всё плохо, всё растёт, она боится перерождения в саркому и сказала, что надо удалять матку, яичники остаются, с ними всё хорошо. Но направила на вердиктную консультацию к доктору, который делает операции, она посмотрела последнее узи, прсмотрела на кресле, сказала, всё огромное, надо удалять, но так как у меня достаточно молодой возраст, а удалить всегда можно и жто последнее, что можно предпринять, сказала, давайте попробуем проколоть 3 укола луприд депо, есть случаи, что всё уменьшается в разы и можно на какой-то период отложить операцию. Сейчас второго ребенка нет в планах с мужем, если только позже, но она сказала никаких сроков в запасе нет, либо сейчас после уколов, либо никогда. В общем мне предложено 2 варианта-уколоться и смотреть, что будет дальше, либо ложиться и удалять матку с шейкой. Последнее узи было 22 августа 2019, на 7-й день месячных, размеры матки: длина 120мм, пер.-задн. 119, ширина 120, контуры неровные, структура неоднородная, по передней стенке интер.субсер. м/у 36×30, в дне 52×30мм, это то, что можно измерять аппаратом, так вся матка усеяна узлами мелкими, как виноградные гроздья, эндометрий 7 мм-1 фаза, левый яичник 34×15, без изменений, правый 35×18, без изменений. Заключение:множественная миома матки в сочетании с аденомиозом. До э того предыдущее узи было сделано 6 апреля 2019 года, размеры матки: длина 98, пер.-задн. 110, ширина 115, контуры неровные, структура неоднородная, диф., по передней стенке интер. субсер. м/у 38×32, рядом 35×31мм, эндометрий 12 мм, яичники без изменений. Так так с апреля по август матка увеличилась и сейчас соответствует 14 неделям беременности, мой врач считает выходом только удаление. Единственным выходом она тоже считает вкалывание уколов, но потом на отмену поставить спираль мирену на 5 лет и не трогать матку. Другие нинекологи вообще не знают, что со мной делать и говорят напрямую, мы не в силах помочь, Вам нужны специалисты совсем другого уровня, таких в Гомеле я вряд ли найду. Был взят аспират из полости матки 6 июня 2019 года, по результатам все нормально, диагноз миома в срчетании с аденомиозом, патология эндометрия. Закоючение: эндометрий в фазе секреции, средняя стадия. Сдавала кровь на онкомаркеры СА 125 -33, 11, НЕ 4 -81,53, ROMA premenopausal -21,31, ROMA postmenopausal - 27,87, PЭА/CEA - 0,919. Гемоглобин 147, сывороточное железо 21,7, ферритин 38.2. По мимо этого мой гинекого направила меня лечить кисту на шейке матки, постоянно был воспалительный тип мазка, цитология нормальная, сказала идите лечите, свечи не помогут, ничего не поможет идите лечить, придёте как новая копейка с хорошей шейкой. Я пошла дополнительно платно сделала кольпоскопию, врач сказал гнойная киста, надо лечить, она как прыщик на лице с содержимым и никуда она не исчезнет. 8 апреля платно мне профессор сделал радиоволновую аблацию шейки, через два месяца пришла к этому профессору на прием, сделал кольпоскопию, сказал все зажило, живите как жили раньше и отправил домой. Я пошла опять дополнительно к другому специалисту на кольпоскопию, она посмотрела, сказала рана еще совсем не затянулась, дать зажить ещё 2 месяца и не лазить туда. А последний врач, у которого я была я приеме, которая оперирует и сказала пока пробовать уколы, при осмотре на кресле сказала, что шейка в плохом состоянии, что на ней очаги эндометриоза и это скорее всего после аблации. Она даже сфотографировала и показала, какая она воспаленная, красно-бордового цвета, поэтому и сказала, что если удалять матку, шейку такую я не оставлю Вам, она в плохом состоянии. А если будете колоть уколы, то за 3 месяца, пока прокалываюсь, полечить опять шейку, но уже не у профессора, который делал аблацию. Аспират брали, потому что после этой аблации у меня на 16-й день месячных и до начала следующих кровит и так из месяца в месяц, хотя раньше со всеми моими проблемами такого никогда не было. Моя гинекогол, сказала, что это не связано с аблацией, это просто так совпало, это Ваш эндометриоз дает о себе знать, поэтому чтоб исключить страшное, мне взяли аспират. А эта врач, которая операции делает сказала, что это шейка с эндометриозными очагами кровит. Про ЭМА говорят, что мне ее делать нельзя, так как у меня вся матка как в виноградных гроздьях усыпана, это не мой вариант. В от такая ситуация. Извините, за такой длинный текст. Что возможно в моей ситуации, подскажите, пожалуйста. Или вариантов никаких, только удаление матки с шейкой. Но 30 лет, как-то жестоко совсем...У наших врачей такое мнение, кровит, шейка плохая, матка вся усеяна узлами, всё растёт, эндометриоз, только на удаление с помощью полостной операции. В уколах луприд депо я, если често, не вижу смысла. Что будет со мной, после их отмены... я думаю об этом. И есть ли в моей ситуации необходимость удалять матку с шейкой? Заранее спасибо!

Описание: День 0. Непосредственно после пункции оценивают зрелость полученных ооцит-кумулюсных комплексов (ОКК). ОКК с прозрачным кумулюсом как правило содержит зрелый ооцит и получает оценку «1-1».При пункции возможно получение зрелых, незрелых, а также дегенеративных и разрушенных яйцеклеток. Точная оценка состояния ооцита возможна только после его очистки перед проведением ИКСИ.

В зрелых, готовых к оплодотворению ооцитах определяется первое полярное тельце. В эмбриологическом протоколе зрелый ооцит обозначают MII.

Если процесс созревания ооцита в фолликуле нарушен или неправильно введен триггер (ХГ), то существует большая вероятность получения незрелых клеток, обозначаемых – MI и GV (Рис.1). Возможна и полная дегенерация ооцита (Deg).

Рис 1. Ооциты, полученные при пункции яичников после удаления кумулюса (денюдации). А - MII, Б – MI, В – GV. Pb – полярное тельце, ZP – блестящая оболочка

Через 18-20 часов после добавления сперматозоидов или ИКСИ (1-е сутки) при нормальном оплодотворении образуются два пронуклеуса. Это предшественники ядер будущих клеток-бластомеров, на которые начинает делиться оплодотворенная яйцеклетка. При правильном оплодотворении оба пронуклеуса четко различимы. В этом случае им присваивают оценку 2pN. Если пронуклеусов не видно, что обычно связано с отсутствием оплодотворения, в протокол записывается 0pN. При неправильном оплодотворении возможно появление нескольких пронуклеусов, что отражается в записи, например 3pN, 6pN и т.д.(Рис2). «Неправильно» оплодотворенные ооциты не пригодны для дальнейшей работы и утилизируются.

Рис 2. Первый день развития in vitro – формирование зиготы и образование пронуклеусов. А – 2pN (нормальное оплодотворение) – два пронуклеуса Б – 3pN (аномальное оплодотворение) – больше, чем два пронуклеуса.

Дальнейшее развитие эмбриона, дробление, происходит в течение пяти-шести дней. Оценка качества эмбрионов проводится через 40-42 часа (2 сутки), 72-74 часа (3 сутки) и 120 часов (5 сутки) после оплодотворения. Дробление эмбриона должно быть симметричным (получаются бластомеры одинакового размера) и равномерным (все бластомеры претерпевают деление). Для наглядности эмбриологи используют численно – буквенную систему оценки качества, где цифра означает количество бластомеров, а буква их качество. Для обозначения эмбриона хорошего качества используется буквенный индекс «А», среднего «B», низкого «С». Возможны и промежуточные варианты, например АВ, ВА, ВС, СВ, когда сложно дать однозначную оценку (Рис3).

2-й день (4А) 3-й день (8А) 4-й день (comp)

Рис 3. Дробление эмбриона в течение первых трех суток in vitro и компактная морула на 4-й день развития. Представлены эмбрионы отличного (А) качества. B – бластомер ZP – блестящая оболочка.

Для второго дня культивирования перспективными считаются эмбрионы с четырьмя бластомерами - 4А, 4АВ, 4В. Для третьего - восьмиклеточные (8А, 8АВ, 8В). Эмбрионы плохого качества (ВС, СВ, С) как правило не переносят, оставляют до пятого дня и при формировании нормальной бластоцисты замораживают или переносят в матку. В случае неравномерного дробления (наличия бластомеров разной величины) потенциал эмбриона к имплантации снижен, и обозначается это приставкой «un», например 3Вun. Наличие фрагментов цитоплазмы обозначают «fr», например 8ВСfr (Рис.4). Оценивается и наличие вакуолей. При их визуализации ставится отметка «vac». В норме каждый бластомер несет одно ядро, если хотя бы в одном бластомере визуализируется больше одного ядра, это называется мультинуклеацией (mN) и указывает на значительную вероятность хромосомной патологии данного эмбриона.

Рис 4. Дробление эмбриона в течение первых трех суток in vitro. Представлены эмбрионы хорошего (ВА, В) и удовлетворительного (ВС) качества. Во втором ряду эмбрионы с неравномерным дроблением (3Bun и 4BAun).

К концу третьих и на четвертые сутки культивирования эмбрион начинает компактизацию (границы его клеток становятся неразличимы) и готовится к образованию бластоцисты. Его клетки могут быть частично (p.comp) или полностью компактизованы (comp) (Рис.5). Обычно оценка эмбрионов на четвертые сутки не проводится ввиду малой информативности данной стадии развития. Однако наличие компактизации на вторые сутки может свидетельствовать об аномальном развитии и обязательно должна отражаться в эмбриологическом протоколе.

Рис 5. Стадия компактизации 4-е сутки культивирования A – p.comp Б - comp

На пятые сутки, примерно через 120 часов после оплодотворения эмбрион образует бластоцисту (Bl) (Рис.6). Оценка качества бластоцист подразумевает ее размер, который отражается цифрами от 1 до 5; состояние внутренней клеточной массы (ВКМ) (от «A» до «С») и окружающих ее клеток – трофобласта (от «а» до «с»). Лучшими для переноса будут бластоцисты размера от 3 до 5, имеющие многоклеточную ВКМ и трофобласт – Bl4Aa, Bl4Ab. Бластоцисты среднего качества обозначаются как – Bl2Bb, Bl3Bb, а плохого – BlCc.

Рис 6. Бластоцисты на пятый день развития in vitro. e.bl – ранняя бластоциста, Bl3Ab – экспандированная бластоциста, Bl5Ab – бластоциста перед хетчингом, ВКМ – внутренняя клеточная масса.

Дальнейшее развитие эмбриона происходит уже в матке после имплантации. Для успешной имплантации бластоцисте необходимо выйти из окружающей ее блестящей оболочки. Данный процесс называется вылупление, или хетчинг. В случае, когда эмбриолог отмечает изменения блестящей оболочки и после криоконсервации эмбрионов процесс самостоятельного вылупления бластоцисты может быть затруднен и его возможно облегчить применяя вспомогательный хетчинг. В нашем центре мы используем наиболее эффективный лазерный вспомогательный хетчинг.

Самая высокая частота оплодотворения получена при переносе эмбрионов на стадии бластоцисты. Так, в нашем центре она составляет 53%. В то время, как при переносе на стадии 6-8 бластомеров – 47%.

Замораживание и ПГД также лучше всего выполнять на стадии бластоцисты. Однако, не все эмбрионы доходят до бластоцисты. Поэтому общепринятым считается следующий подход: если на 5 день культивирования имеется меньше 5 эмбрионов, как минимум один переносят, остальные оставляют до 5 дня. Из достигших бластоцисты еще один может быть перенесен (двойной перенос), остальные замораживают. Если на 3 день эмбрионов 5 и больше, их не переносят и оставляют культивировать до 5 дня. На 5 день одну, реже две бластоцисты переносят, остальные замораживают.

В заключение следует отметить, что описываемые морфологические критерии оценки качества эмбрионов являются основными, необходимыми, но не всегда достаточными для выбора эмбриона для переноса. Так, нередко после переноса эмбрионов высшего качества имплантация не наступает и, наоборот, бывают случаи наступления и успешного развития беременности при переносе эмбрионов плохого качества. Поэтому существуют дополнительные способы прогноза имплантации эмбриона (time-laps, ПГС, анализ метаболитов и др.), которые дополняют морфологические критерии и обеспечивают в совокупности выбор лучшего эмбриона.

Бластоциста в процессе хетчинга (выхода из блестящей оболочки для имплантации)

А – световая микроскопия HMC контраст Б – Сканирующая электронная микроскопия - ZP – блестящая оболочка TE – трофэктодерма ВКМ – внутренняя клеточная масса

Характеристика эмбрионов ЭКО

Характеристика эмбрионов ЭКО

В процессе стимуляции овуляции на первом этапе ЭКО врачи получают не одну, а сразу несколько женских половых клеток.

Все, полученные клетки (ооциты), оплодотворяются методом ЭКО или ИКСИ. Однако в полость матки переносятся не все эмбрионы.

Как правило, это 1-2 самые перспективные, на взгляд эмбриолога, эмбриона.

Качество эмбрионов ЭКО мы оцениваем в основном по их морфологии. Существует множество критериев для оценки:

1. Число клеток в эмбрионе. В норме оно не должно быть больше или меньше количества, соответствующего дню развития эмбриона.
2. Степень фрагментации (безъядерные фрагменты цитоплазмы, количество и локализация которых, могут влиять на дальнейшее развитие эмбриона)
3. Равномерность и синхронность дробления. После слияния яйцеклетки и сперматозоида образуется зигота (оплодотворенная яйцеклетка, которая начинает активно делиться). Данный процесс называют дроблением, а клетки эмбриона – бластомерами. Они должны быть одинаковой формы и размеров.
4. Наличие в клеточной цитоплазме всевозможных включений или отсутствие таковых.

Также мы обращаем внимание на наличие так называемых мультиядерных бластомеров. Под данным термином подразумевают наличие бластомеров, имеющих не одно, а несколько ядер. В норме таких бластомеров быть не должно.

Оценка характеристик эмбрионов ЭКО

Существует несколько классификаций качества эмбрионов, находящихся на первых днях развития. Прежде всего, специалист смотрит на количество клеток.

В норме на 2 день развития эмбрион состоит из 2-4 клеток, на 3 день – из 6-8, и на 4 сутки – количество клеток сложно сосчитать, потому что начинается их слияние и эмбрион превращается в морулу.

При описании эмбриона 2-3 дня развития к числу, указывающему на количество бластомеров добавляется и буквенное, отражающее качество и морфологию самих бластомеров, и наличие или отсутствие фрагментации.

• А – безъядерные фрагменты отсутствуют, бластомеры ровные, одинакового размера, имеют одно ядро, гомогенная цитоплазма;
• В – количество безъядерных фрагментов цитоплазмы достигает 25%, но не превышает данную границу;
• С – число фрагментов без ядер находится в пределах от 25 до 50%, есть нарушения в размерах и форме бластомеров, имеются включения в цитоплазме;
• D – более 50% безъядерных фрагментов и т.д..

Данное состояние называется тотальной фрагментацией. Такие эмбрионы не используют для переноса в полость матки (за исключением той ситуации, когда нет эмбрионов другого качества, и пациент настаивает на переносе). Надо сказать, что даже в таких случаях может наступить нормальная беременность, только вероятность наступления будет во много раз ниже, чем при переносе эмбрионов качества А или В.

В «ВитроКлиник» мы пользуемся цифро-буквенными характеристиками. При этом цифра отображает количество бластомеров в эмбрионе, а буква – морфологию и качество.

Классификация бластоцист ЭКО

Бластоцистой называется эмбрион 5-6 суток развития. Он состоит из нескольких десятков клеток, соединенных в шаровидное образование с полостью, окруженный оболочкой. После разрыва этой оболочки (хэтчинга) начинается процесс имплантации (внедрения эмбриона в слизистую оболочку матки).

Существуют несколько классификации бластоцист, в «ВитроКлиник» мы используем шкалу Гарднера. Данная шкала состоит из одной цифры и двух заглавных букв. Цифра описывает размер полости бластоцисты, первая буква - качество эмбриобласта (внутренней клеточной массы), вторая буква - трофобласт (качество внешней клеточной массы):

1) Размер бластоцисты, объем ее полости:

1. Полость занимает менее 50% бластоцисты.
2. Полость занимает 50% бластоцисты.
3. Полость занимает более 75% бластоцисты.
4. Бластоциста, полость которой в 2 раза превышает клеточную массу.
5. Бластоциста, в которой началось вскрытие оболочки (хетчинг)
6. Бластоциста, полностью освобожденная от оболочки, готовая к имплантации.

2) Характеристика клеток, из которых будет развиваться зародыш (внутренняя клеточная масса):

• A. Клеток много, границы между клетками неразличимы.
• B. Клеточные формы различимы, отмечается наличие некоторых незначительных дефектов в них (зернистость, и т.д.)
• C. Дефекты в клетках значительные, имеются признаки апоптоза.
• D. Дегенерация клеточного состава.

3) Характеристика клеток внешней клеточной массы, которые формируют внезародышевые структуры (плацента, амниотическая оболочка).